Расшифровка ПЦР при цитомегаловирусе

Отрицательный результат ПЦР на ЦМВ говорит об отсутствии заражения. Такой ответ бывает в двух случаях:

  1. В материале не обнаружено ДНК фрагментов цитомегаловируса.
  2. В материале недостаточно клеток, необходимых для проведения анализа и получения достоверного результата (нарушены правила сдачи материала или проведения анализа).

Положительный результат ПЦР на ЦМВ говорит об обнаружении патогена в организме. Такой ответ ПЦР возможен в двух случаях:

  1. При исследовании было найдено ДНК цитомегаловируса. Пациент имеет первичное или повторное заболевание.
  2. В биоматериале были обнаружены клетки, не специфичные для биоматериала (нарушены правила сдачи материала).

При анализе данных ПЦР на цитомегаловирус учитывается наличие антител IgM и IgG.

Наличие IgG говорит о том, что инфицирование вирусом произошло относительно давно, не менее 2 недель до проведения теста. Присутствие этих антител также может свидетельствовать о том, что заражение произошло несколько лет назад и возбудитель в организме находится в «пассивном» состоянии.

Положительная реакция на IgG может говорить, что у пациента есть иммунитет, он является носителем вируса и заражение является невозможным; что у пациента произошло повторное обострение болезни из-за снижения общей защитной функции организма.

Наличие в биоматериале антител IgM свидетельствует о том, что заражение произошло относительно недавно и является только появившимся, первичным, т. е. до этого в организме пациента не было антител к этому вирусу. Также IgM могут указывать, что вирус «активизировался» и хроническое состояние латентной инфекции перешло в острое.

Присутствие IgM в расшифровке ПЦР не всегда говорит о наличии ЦМВ. Результат может быть ложноположительным. В данном случае требуется более детальное обследование и наблюдение «в динамике».

Цитомегаловирус присутствует в организме около 90% взрослых людей. И только у половины из них он может активизироваться и привести к развитию болезни. Симптомы, которые он вызывает, сходны со многими другими заболеваниями. Чтобы врач смог поставить верный диагноз и выбрать самый эффективный способ лечения необходимо сдать ПЦР на определение ЦМВ.

Особенности трактовки результатов

Расшифровка анализа крови методом ИФА на цитомегаловирус выполняется лечащим доктором. Лаборатория в заключении исследования указывает только титр антител и референсные значения.

При проведении ИФА возможны такие варианты заключения:

  • IgG и IgM отрицательный – означает, что пациент никогда не болел цитомегаловирусной инфекцией;
  • ІgG и IgM положительные – у пациента обострение длительно протекающей цитомегаловирусной инфекции. В данном случае необходимо провести терапию;
  • IgM отрицательный и IgG положительный – пациент перенёс цитомегаловирусную инфекцию, но при воздействии неблагоприятных факторов возможна реактивация процесса;
  • положительный IgM и отрицательный IgG – говорит об остром периоде заболевания, и пациенту показано лечение.

Расшифровка анализа РИФ на цитомегаловирус может быть следующей:

  • коэффициент в диапазоне от 0 до 0,8 – норма, то есть ЦМВ не обнаружен;
  • коэффициент выше 0,8 – у пациента присутствуют антигены ЦМВ. В таком случае необходимо сдать повторно анализ через 10-14 дней.

Интерпретация результатов ПЦР достаточно простая – положительный результат означает наличие вируса в организме, а отрицательный – отсутствие.

Поскольку цитомегаловирус особенно опасен во время беременности, то исследование на ЦМВ часто назначают на этапе планирования зачатия, чтобы оценить риск осложнений. Отрицательный результат у женщин до беременности говорит о риске заражения этой инфекцией в период вынашивания ребёнка, а положительный – о минимальном риске осложнений.

Виды исследований для диагностики ЦМВ

Диагностировать наличие патологии поможет проведение следующих исследований:

  • иммуноферментный анализ (ИФА). Является наиболее точным видом анализа на цитомегаловирус.
  • полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая дает возможность обнаружить ДНК вируса, определить время нахождения вируса в организме, узнать активен ли вирус в данный момент или нет;
  • непрямая иммунофлюоренция (РИФ). С помощью данного метода можно установить срок присутствия вируса в организме;
  • культуральный метод, при котором выращивают вирус на питательных средах. Редко применяется из-за длительности анализа.

Иммуноферментный анализ

Для определения наличия патологии необходима проверка крови на антитела, при этом видов анализа может быть несколько, но самым надежным считается проведение иммуноферментного исследования.

ИФА позволяет определить количество и свойства специфичных Anti-CMV антител. К тому же этот метод относится к самым быстрым, точным и наиболее доступным.

Какие показатели определяют в ИФА анализе

В человеческом организме присутствуют различные типы иммуноглобулинов, однако если рассматривать цитомегаловирус, действенными являются IgM, IgG. Первый тип вырабатывается на начальном этапе инфицирования, обеспечивая подавление первичного заражения. Второй тип генерируется позднее и призван защищать организм от цитомегаловируса в течение всей последующей жизни человека.

Теперь о том, какие свойства имеют серологические маркеры IgM и IgG, рассмотрим их наряду с авидностью IgG более подробно, для чего имеется сводная таблица:

Иммуноглобулины Описание
IgM Формируются первыми спустя 5 или 7 суток как ответ на реактивацию или внедрение возбудителя. Дают возможность определить первичную инфекцию в острой стадии, либо обострение хронической патологии. Anti-CMV IgM способны демонстрировать ложноположительный результат на фоне реакции с иными герпес-вирусами. В случае первичной инфекции антитела могут выявляться на протяжении примерно трех месяцев. Если это реактивация, срок составляет от двух-трех суток до недель. У новорожденных на фоне особенностей иммунной системы выработка этих антител может отсутствовать даже в случае заражения, потому может потребоваться дополнительный анализ ПЦР, исследующий разные биожидкости.
IgG Anti-CMV IgG формируются через две или три недели после заражения, сохраняясь после этого на протяжении всей жизни, при этом их уровень не позволяет определить активность процесса. Увеличение количества этих антител указывает на активность болезнетворных процессов и требует выработки тактики ведения. Тестирование проводят при наличии положительного IgM, дабы исключить возможность ложноположительного итога. Также тест требуется проводить при отрицательном IgM, чтобы иметь возможность подтвердить отсутствие реактивации заражения.
Авидность IgG Позволяет определить давность заражения инфекцией – после первичного инфицирования низко авидные антитела наблюдаются от трех до четырех месяцев, после чего их сменяют высоко авидные антитела. При наличии низко авидных IgG говорят о первичном заражении, которое длится на протяжении трех-четырех последних месяцев. При наличии высоко авидных IgG утверждают, что заражение имело место за три-четыре месяца до проведения обследования. Этот показатель особо актуален при проведении обследования беременных, если до зачатия его наличие не проверялось.

ПЦР метод

При назначении полимеразной цепной реакции врач хочет узнать присутствует возбудитель в крови или нет. При положительном анализе можно еще установить и тип возбудителя.

В результатах данного метода может быть только 2 результата:

  • Обнаружен — это означает положительный результат. Заболевание при этом может находиться как в острой, так и скрытой фазе.
  • Не обнаружен. Такой результат не всегда свидетельствует об отсутствии цитомегаловируса в организме. Для подтверждения лучше использовать метод ИФА.

Что касается других диагностических методов, то их относят к прямым: они позволяют определить наличие возбудителя в исследуемых материалах, а не антитела к нему. При этом подбор биологического материала проводится с учетом развития этапов патологического процесса, его клинических проявлений и целей проведения лабораторных исследований. Использоваться может слюна, кровь, соскоб со слизистой оболочки половых органов.

Сущность исследования и расшифровка его результатов

Как правило, для взрослого человека, состояние здоровья которого находится на удовлетворительном уровне, цитомегаловирус не представляет опасности. Тем не менее во многих ситуациях инфицирование может привести к негативным последствиям. Особенно актуально данное замечание не только для будущих матерей и тех, кто только задумывается о зачатии малыша, но и для младенцев и больных, страдающих от врожденного либо приобретенного иммунодефицита.

Именно этим категориям людей необходим анализ крови на цитомегаловирус при проявлении самых первых признаков заражения либо в случае рецидива самого вируса. Чем более ранней будет диагностика, тем более высокой будет эффективность, и потребуются более щадящие терапевтические мероприятия. Только так удастся избежать тяжелых осложнений для здоровья пациента.

У больных людей с высокой вероятностью появления осложнений, вызванных инфекцией, вирус после заражения либо реактивации может развиваться в латентной форме на протяжении полумесяца, который и составляет срок инкубационного периода. В этот момент признаки патологии никак не проявляются. Однако происходит инфицирование многих внутренних органов и систем. У женщин, ожидающих ребенка, заражение плода происходит именно в указанный период.

К моменту проявления первых признаков вирус поражает практически все тело. В это время будущие мамы и иммунодефицитные пациенты будут нуждаться в очень тяжелом лечении, которое к тому же имеет риск закончиться неудачей.

Если же провести анализ на цитомегаловирус раньше, то, возможно, вирус будет обнаружен еще на этапе заражения первых органов. Помимо исследования крови на наличие цитомегаловируса, будущие мамы сдают и общий анализ крови. Если вирус обнаружен, а лечение начато на раннем этапе развития инфекции, пациенту удастся избежать всех опасных последствий.

Если сдавать анализ и приступать к лечению как можно раньше, то обычно удается избежать приема тяжелых лекарственных препаратов, которые могут нанести вред здоровью. В этом случае лечение будет более щадящим.

Основная сложность раннего выявления вируса заключается в том, что до проявления первых очевидных симптомов не удается понять, произошло заражение или нет. Именно по этой причине в ходе ведения беременности либо в начале лечения, связанного с трансплантацией органов, а также при поддержке организма в случае развития иммуннодефицитного состояния сдача анализов крови осуществляется довольно часто, что позволяет идентифицировать вирус уже на раннем этапе заражения. Однако в зависимости от категории пациентов анализ на ЦМВ по срокам может различаться.

Показания к проведению исследования

Как правило, цитомегаловирус не представляет опасности для человека с нормальным иммунитетом и протекает бессимптомно; иногда проявляются легкие симптомы общей интоксикации организма, не приводящие к развитию осложнений. Однако для беременных женщин и людей с иммунодефицитом острая инфекция может представлять опасность.

Иммуноферментный анализ на антитела к ЦМВ проводится, если наблюдаются следующие симптомы:

  • повышение температуры тела;
  • ринит;
  • боль в горле;
  • увеличение лимфоузлов;
  • воспаление и отечность слюнных желез, в которых концентрируется вирус;
  • воспаление половых органов.

Чаще всего цитомегаловирус сложно отличить от обычного острого респираторного заболевания. Стоит отметить, что яркое проявление симптомов свидетельствует об ослаблении иммунитета, поэтому в таком случае следует дополнительно провериться на иммунодефицит.

Таким образом, показания к назначению анализа следующие:

  1. Беременность.
  2. Иммунодефицит (вызванный ВИЧ-инфекцией, приемом иммунодепрессантов или врожденный).
  3. Наличие вышеописанных симптомов у человека с нормальным иммунитетом (предварительно следует дифференцировать болезнь от вируса Эпштейна — Барр).
  4. Подозрение на ЦМВ у новорожденного ребенка.

Учитывая возможное бессимптомное течение болезни, во время беременности анализ следует проходить не только при наличии симптомов, но и для скрининга.

Как передаётся вирус

Ещё 10 лет назад цитомегаловирусные инфекции считались половыми. ЦМВ называли «поцелуйной болезнью», считая, что болезнь передаётся с поцелуями. Современные исследования доказали, что цитомегаловирус передается при различных бытовых ситуациях — пользовании общей посудой, полотенцами, при рукопожатии (если на коже рук имеются трещины, ссадины, порезы).

Те же медицинские исследования выяснили, что чаще других цитомегаловирусом заражаются дети. Их иммунитет находится в стадии формирования, поэтому вирусы проникают в детский организм, вызывают болезнь или формируют носительство.

Герпетические инфекции у детей проявляются видимыми симптомами только при низком иммунитете (при частых болезнях, авитаминозе, серьёзных иммунных проблемах). При нормальном иммунитете знакомство с вирусом ЦМВ протекает бессимптомно. Ребёнок заражается инфекцией, но никаких проявлений (температура, воспаление, насморк, сыпь) за этим не следует. Иммунитет справляется с чужеродным вторжением без подъёма температуры (формирует антитела и запоминает программу их производства).

Разновидности исследований на выявление вируса

Интерпретация доктором

Важным моментом в диагностике инфекции является не только определение нормы антител к цитомегаловирусу, но и анализ содержания различных классов иммуноглобулинов и степени их авидности. Это позволяет провести получить комплексный результат анализа крови и выбрать дальнейшие методы обследования и лечения больного.

Доктора отмечают, что соблюдение правил сдачи анализов позволяет получить достоверные результаты и снизить риски ложноположительных и ложноотрицательных данных. В связи с этим, каждому пациенту дают рекомендации о том, как сдавать кровь и в какое время это лучше всего сделать.

При проведении ИФА, у больного возможны следующие результаты:

анти-CMV IgG (ИХЛА) отрицательный, так же как и антитела класса M. При подобном результате, у больного отсутствует инфекцию

Особенно важно это в период планирования беременности или ее течения для подтверждения отсутствия рисков для развивающегося плода. Необходимо отметить, что подобные результаты могут отмечать в серонегативный период, продолжающийся 7-10 дней от начального проникновения герпетического вируса в организм;
положительные IgG, IgM, но IgG нарастает по своей концентрации, после первоначального отсутствия

При определение авидности антител к цитомегаловирусу она низкая, что свидетельствует о недавнем первичном заражении. Если подобная ситуация наблюдается у беременной, то для плода существует высокий риск;
если у больного IgG положительный, IgM отрицательный или достаточно низкого уровня, то это говорит о длительном существовании первичной инфекции. В подобной ситуации доктора знают, что означает CMV IgG положительный при беременности – возбудитель может проникнуть в организм плода и вызвать развитие пороков развития;
когда антитела к цитомегаловирусу класса IgG положительные, а IgM полностью отсутствует, и это происходит при высоких показателях авидности антител, это свидетельствует о латентной стадии болезни, т.е. длительной ремиссии. Важно понимать, что это значит – anti-CMV отрицательный? Подобная ситуация говорит о том, что у больного на протяжении 4-6 месяцев отсутствовали рецидивы заболевания. В этом случае, вероятность аномалий развития у плода минимальна;
в том случае, когда антитела к кардиолипину IgG и IgM повышены, но авидность достаточно низкая, у пациента наблюдается реактивация инфекционного процесса.

Важно понимать, что отвечать на вопросы: что означает положительный CMV IgG и как сдавать анализ на цитомегаловирус, должен лечащий врач, у которого необходимо всегда консультироваться до и после проведения исследований. ПЦР слюны, крови и соскобов проводят для подтверждения наличия герпесвирусной инфекции одновременно с ИФА

Когда антитела к цитомегаловирусу IgG положительные, всегда следует определять степень их авидности. Если при выявлении антител IgG обнаружена авидность больше 140, то это свидетельствует о давности инфицирования.

Подобные результаты, а также авидность anti-CMV IgG 200 и более при высоком титре IgG соответствует ремиссии заболевания, существующего у пациента не один год.

Показатель авидности – важный диагностический показатель, который должен использоваться у всех пациентов с антителами к ЦМВ IgG положительными.

Методика проведения анализа

Для проведения анализа необходимо собрать около 2-3 мл. слюны в одноразовую стерильную пробирку с крышкой. Отбор материала производят натощак в домашних  условиях. Не рекомендуется полоскать полость рта и чистить зубы перед сбором слюны. Нельзя употреблять спиртные напитки за двое суток до анализа. Исследование проводится до начала приема антибактериальных и противовирусных препаратов.

Образец слюны необходимо доставить в лабораторию в тот же день.

Анализ проводится методом полимеразной цепной реакции и  проводится в амплификаторе после обработки специальными реагентами. Для обнаружения копий фрагмента ДНК цитомегаловируса к полученному материалу добавляют специальные маркеры.

Диагностика для обнаружения цитомегаловируса

Для обнаружения этого патогена в организме применяются различные лабораторные методики. Обычно для анализа берется кровь пациента с целью определить в ней наличие антител к вирусу. При необходимости возможен забор и других биологических жидкостей – слюны, мочи, грудного молока, ликвора.

Наиболее распространенные методы исследования:

  • ПЦР (Полимеразная цепная реакция). Позволяет напрямую обнаружить генетический материал вируса, либо его отдельные фрагменты. На основании полученных данных можно определить время заражения и текущую стадию развития инфекции.
  • Иммуноферментный анализ (ИФА). Дает точную информацию о количестве антител к цитомегаловирусу.
  • Непрямая иммунофлюоресценция (РИФ). Менее точный анализ в сравнении с ИФА, но дает возможность определить время заражения.
  • Вирусологический посев. Позволяет обнаружить даже небольшие количества возбудителя. Применяется редко так как требует 1-2 недели для получения результата и дает не очень точные данные. В настоящее время эту методику практически вытеснили сочетание ПЦР и ИФА.

Также применяется цитологический анализ биологических жидкостей (слюны, мочи). Суть метода заключается в прямой микроскопии, во время которой обнаруживаются специфические изменения в пораженных вирусом клетках. Они увеличиваются в размерах, приобретают ряд особых признаков, которые позволяют с высокой достоверностью обнаружить заражение.

Диагностирование инфекции у детей и беременных женщин

Анализ крови на ЦМВИ входит в комплекс обязательных обследований для женщин планирующих беременность, беременных. Также анализ обязательно делают новорожденным и детям раннего возраста. Обычно применяют иммуноферментный метод так как он дает самую важную в данном случае информацию о состоянии иммунитета и фазе развития заболевания.

Для беременных и планирующих беременность этот анализ важен так как цитомегаловирусная инфекция в острой фазе может стать причиной развития врожденных аномалий

Поэтому важно точно определить насколько организм женщины способен подавлять вирус при его наличии

Для новорожденных обязательная диагностика ЦМВ важна так как до 3-5 лет защитные силы организма находятся в стадии формирования и не всегда способны эффективно подавлять эту инфекцию.

Опасность ЦМВИ и ее особенности

Цитомегаловирус представляет собой особый вид вируса, который после инфицирования обитает в клетках организма людей, при этом неважно к какой возрастной категории они принадлежат. Если человек будет инфицирован ЦМВ, то у него на протяжении всей оставшейся жизни будет присутствовать данная инфекция в организме

Если иммунитет инфицированных людей будет в полной мере выполнять возложенные функции, то вирус будет находиться под контролем, благодаря чему его клетки не будут размножаться. В противном случае цитомегаловирус под воздействием любого внешнего фактора активизируется и очень быстро произойдет его размножение. Проникая в клетки человеческого организма, вирус начинает прогрессировать, на фоне чего они стремительно начнут увеличиваться в размерах.

цитомегаловирус под микроскопом

После проникновения в человеческий организм цитомегаловируса, для него наступает инкубационный период, продолжительность которого может достигать 60-ти суток. После этого инфекция может начать свое активное проявление, сопровождающееся характерной симптоматикой.

Зараженные цитомегаловирусом люди в большинстве случаев испытывают общее недомогание, у них может повышаться температура и наблюдаться все признаки респираторного заболевания. Со временем у такой категории пациентов начинают воспаляться лимфатические узлы, появляется болевой синдром в суставах, наблюдаются кожные высыпания и т. д.

Цитомегаловирус может стать причиной серьезных последствий и осложнений, поэтому крайне важно своевременно начать комплексное медикаментозное лечение

Ссылка на основную публикацию